在微生物实验室中，制作母种培养基是一项基础且关键的工作。以下详细介绍如何配制常用的母种培养基——马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）。
1. 首先，挑选优质的马铃薯，去皮并去除发绿的芽眼和外皮，切成薄片。取200克马铃薯片放入锅中，加入1000毫升水，加热至沸腾后转小火煮30分钟。通过四层纱布过滤，收集滤液。若滤液量不足1000毫升，需加适量水补足。
2. 在滤液中加入琼脂，继续加热至琼脂完全溶解。随后加入葡萄糖，调整总体积至1000毫升，搅拌均匀后，趁热分装到试管或三角瓶中，以备使用。
3. 分装试管时，确保培养基的量占试管长度的1/5至1/4，避免培养基粘附在试管口内壁。如有粘附，需及时擦除，防止杂菌污染。
4. 塞入棉塞时，确保棉塞紧贴试管口，塞入长度为棉塞总长的2/3。塞好棉塞的试管应绑扎成捆，并用牛皮纸包扎试管口，防止灭菌时棉塞吸水变形，导致杂菌感染。
5. 进行高压灭菌。将绑扎好的试管放入手提式高压灭菌锅中，在0.15兆帕的压力下灭菌30分钟。使用高压锅时，必须遵循操作规程，特别注意加水和熄火环节，避免锅烧干、水浸试管或试管破裂等事故。
6. 灭菌后，取出试管待其冷却至50至60摄氏度，然后放置在木架或木条搭成的斜面上，使培养基凝固成斜面。斜面与管口垂直的角度以斜面长度达到管长的1/2为宜。待培养基完全凝固后，即可形成斜面培养基，用于分离和培养母种。
7. 最后，进行培养基的杂菌检查。随机取出3至5支试管，在25至30摄氏度的条件下培养3天左右。若试管培养基表面和内部均无变化，表明灭菌效果良好，可进行接种培养。若斜面出现杂菌菌落，说明灭菌不彻底，需要重新灭菌。这种杂菌检查不是每次灭菌都必须进行，通常在新购灭菌锅首次使用、长时间未使用或在随机抽检时进行。
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回答时间：2024-09-08 04:17
